实验室和医院经常需要长期需要储存细胞。常规做法是将其置于液氮中冷冻(在常压下,液氮温度为-196℃),令细胞处于休眠状态,从而延长细胞的生命。
我们都知道,细胞培养环境需要严格的无菌,尽可能避免细胞出现各类污染状况。细胞在长期储存过程中,虽然置于密闭的冻存管内,对于外在环境的无菌要求,相对于37℃培养时会低一些,不需要严格的无菌,但依然要对液氮罐定期清洁,保证其洁净、无杂物。
那么该如何对液氮罐进行有效清洁呢?
曾有研究人员用拭子涂抹取样培养鉴定的方法,对使用超过一年以上的液氮罐进行检测微生物,发现有被细菌、真菌,甚至是支原体污染的情况出现。
因此,要定期对液氮罐进行清洁。可在补充液氮前,对液氮罐进行清洁。具体做法如下:
1、将冻存的细胞转移至另一洁净的液氮罐中(尽量将所有配套器材全部更换为洁净的,包括提篮和冻存盒)。
2、将待清洁的液氮罐中的液体倒出,静置1-2天,待温度恢复至0℃以上。
3、用常温水冲洗,此时个别融化物质粘在内胆上,应尽量全部洗刷干净(同时对液氮罐中提篮和冻存盒做同样处理)。
4、再用中性洗涤剂轻柔擦拭液氮罐内壁和罐口部位,用水冲洗干净(同时对液氮罐中提篮和冻存盒做同样处理)。
5、建议用支原体祛除喷雾剂,对液氮罐内壁进行喷洒或擦拭(同时对液氮罐中提篮和冻存盒做同样处理)。干燥后,倒入液氮,将细胞装入冻存盒,放进液氮罐中即可。